piątek, 17 marca 2023

Walka z gruźlicą dzięki nowemu zestawowi testowemu MTB Strip

Wykładowcy Wydziału Allied Health Sciences, Chulalongkorn University opracowali MTB Strip Test Kit do diagnostyki gruźlicy (TB), który jest dokładny i łatwy w użyciu, gwarantowany przez 2023 Invention Award od National Research Council of Thailand (NRCT) -; Kolejna nadzieja na ograniczenie rozprzestrzeniania się gruźlicy w Tajlandii. Gruźlica jest jedną z najbardziej zakaźnych chorób, która nadal stanowi wyzwanie dla systemu zdrowia publicznego w dzisiejszych czasach. Chociaż Światowa Organizacja Zdrowia (WHO) dąży do tego, aby rok 2035 (najbliższe 12 lat) był rokiem zakończenia globalnego kryzysu gruźlicy, tendencja choroby jest nadal niepokojąca. Tajlandia jest jednym z 14 krajów o największej zapadalności na gruźlicę. Na szczęście lekooporna gruźlica w Tajlandii została usunięta z listy WHO krajów o najwyższej zapadalności. Pozostały jedynie przypadki zwykłej gruźlicy". Dr Panan Ratthawongjirakul, Associate Professor, Department of Transfusion Medicine, Faculty of Allied Health Sciences, Chulalongkorn University Gruźlica jest chorobą przenoszoną drogą powietrzną, wywoływaną przez bakterię zwaną "Mycobacterium tuberculosis". Rozprzestrzenia się z chorych na gruźlicę na inne osoby poprzez małe wydzieliny z dróg oddechowych (kropelki AKA), które pochodzą z kaszlu, kichania lub mówienia. Łatwo jest się nią zarazić i szybko się rozprzestrzenia. "Jednym z mechanizmów pomagających zakończyć gruźlicę jest identyfikowanie chorych na gruźlicę tak wcześnie, jak to możliwe, aby kontrolować i ograniczać jej przenoszenie" - powiedział Assoc. Prof. Dr Panan o rozpoczęciu projektu badawczego mającego na celu opracowanie paska MTB Strip (Mycobacterium tuberculosis Strip), który jest łatwy w użyciu, wygodny do odczytania gołym okiem oraz dający szybkie i dokładne wyniki. Co ważniejsze, koszt nie powinien być wysoki, aby był dostępny dla lokalnych systemów publicznej służby zdrowia. "Jeśli uda nam się rozpowszechnić ten test wszędzie w małych szpitalach, będziemy w stanie zidentyfikować pacjentów z gruźlicą w ciągu dwóch godzin i szybko przesiać pozytywnych pacjentów do systemu leczenia. Wierzymy, że pomoże to zmniejszyć liczbę przypadków gruźlicy w naszym kraju" - powiedział Assoc. Prof. Dr Panan o celu innowacji MTB Strip. Assoc. Prof. Dr. Panan wymienił różne zalety i wady obecnych metod badania gruźlicy w następujący sposób: Badanie mikroskopowe z zastosowaniem barwienia kwasem-fast jest metodą prostą. Można je wykonać w małym szpitalu, ale wadą jest niska czułość (minimalne stężenie bakterii wymagane do uzyskania pozytywnego sygnału przy badaniu mikroskopowym to 5000-10000 komórek w 1 ml plwociny. Posiew plwociny jest standardową metodą diagnozowania gruźlicy, ale można go wykonać tylko w dobrze wyposażonych dużych szpitalach. Metoda ta musi być wykonana w pomieszczeniu z systemem wysokiego bezpieczeństwa, aby zapobiec rozprzestrzenianiu się na zewnątrz. Na poznanie wyników trzeba czekać ponad miesiąc, co spowoduje opóźnienie leczenia. TB Genotyping polega na pobraniu plwociny pacjenta w celu wyodrębnienia i amplifikacji materiałów genetycznych, które następnie są badane przez maszynę Real-time PCR. Wadą tej metody jest to, że jest kosztowna i wymaga laboratorium z wyspecjalizowanym personelem, dlatego może być wykonywana tylko w niektórych szpitalach. Na podstawie zalet i ograniczeń różnych metod stosowanych do wykrywania gruźlicy, zespół badawczy opracował zestaw MTB Strip Test Kit. MTB Strip TB Test Kit składa się z 2 głównych części: 1. Amplifikacji genetycznej z wykorzystaniem amplifikacji izotermicznej przy użyciu specjalnie zmodyfikowanych i zaprojektowanych starterów. 2. Wykrywanie materiałów genetycznych przy użyciu opracowanych pasków testowych, które są produkowane z zakładów przemysłowych posiadających certyfikat ISO13485 w zakresie produkcji wyrobów medycznych. Assoc. Prof. Dr. Panan wyjaśnił proces stosowania tego zestawu testowego "po otrzymaniu plwociny od pacjenta, DNA zostanie wyekstrahowane i użyte jako szablon. Umieścimy starter specjalnie zaprojektowany do amplifikacji ilości materiału genetycznego w DNA patogenu w plwocinie pacjenta przed wejściem w izotermiczny proces amplifikacji przy użyciu techniki amplifikacji polimerazy rekombinacyjnej. Trwa on zaledwie 20 - 40 minut w temperaturze 37 stopni Celsjusza. Następnie opracowany pasek testowy jest zanurzany w amplifikowanym materiale genetycznym. Wyniki pojawią się na pasku testowym jako wyniki pozytywne i negatywne, tak jak w przypadku znanego nam testu ATK." Kluczową cechą MTB Strip jest jego czułość na gruźlicę. Przy niewielkiej ilości gruźlicy w plwocinie, test może ją wykryć i wyświetlić wynik. Ponadto proces badania trwa mniej niż godzinę i nie wymaga żadnych specjalnych narzędzi. "Wyniki są do 96 procent dokładne w porównaniu z Realtime PCR i innymi powszechnie stosowanymi metodami z użyciem barwników kwasoodpornych. Co ważne, zestaw ten jest tańszy od testów biologii molekularnej, ponieważ nie wymaga żadnych specjalnych narzędzi, takich jak termocykler" - podkreślił Assoc. Prof. Dr. Panan. Zestaw MTB Strip wykorzystuje zasadę amplifikacji materiału genetycznego w jednej stałej temperaturze w połączeniu z pudełkiem cieplnym. W typowym laboratorium tego typu pudełko jest już dostępne. Małe szpitale również mogą korzystać z tej techniki. "Opracowany przez nas zestaw do badania gruźlicy MTB Strip umożliwi wielu istniejącym małym i średnim szpitalom w Tajlandii przesiewowe wykrywanie przypadków gruźlicy, dzięki czemu pacjenci będą mogli szybko otrzymać odpowiednie leczenie, co zmniejszy liczbę przypadków gruźlicy i jej rozprzestrzenianie się".