wtorek, 13 grudnia 2022

Zakażenie Candida auris bez powiązania epidemiologicznego z wcześniejszym ogniskiem choroby

Centers for Disease Control and Prevention (CDC) zaklasyfikowało Candida auris (C. auris) jako pilne zagrożenie publiczne ze względu na jego rolę w zwiększaniu śmiertelności, zdolność do utrzymywania się w środowisku szpitalnym oraz wysoką możliwość rozwoju oporności na leki. W szczególności, ostatnie badanie opublikowane w czasopiśmie Open Forum Infectious Diseases wskazało, że powierzchnie w pobliżu pacjentów z C. auris szybko ulegają ponownemu zanieczyszczeniu po czyszczeniu. Dotychczasowe badania nie wyjaśniły w wystarczającym stopniu środowiskowych rezerwuarów C. auris. Ponadto, w niewielu badaniach odnotowano powiązania epidemiologiczne związane z zakażeniem C. auris. C. auris jest gatunkiem grzyba, który rośnie w postaci drożdży. Jest jednym z niewielu gatunków z rodzaju Candida, które wywołują kandydozę u ludzi. W przeszłości zakażenie C. auris występowało przede wszystkim u pacjentów z chorobami nowotworowymi lub u osób poddawanych zabiegom przez rurki do karmienia. W Stanach Zjednoczonych (USA) pojawienie się C. auris zostało wyśledzone w Nowym Jorku, a nadzór nad tym zakażeniem grzybiczym skupiał się głównie na Nowym Jorku w celu wykrycia ognisk choroby. Ostatnio naukowcy zbadali związek między epidemiologią genomową a zakażeniem C. auris w zachodnim Nowym Jorku. W badaniu opisano pojawienie się C. auris u pacjenta hospitalizowanego w małym szpitalu środowiskowym w hrabstwie Genesee, Nowy Jork (NY). W styczniu 2022 roku, C. auris został wyizolowany z posiewu moczu 68-letniego mężczyzny w 51 dniu hospitalizacji. Pacjent ten nie miał znanych powiązań epidemiologicznych poza swoją najbliższą społecznością. Przed hospitalizacją nie był narażony na innych pacjentów lub członków rodziny związanych z zakażeniem C. auris. Pacjent nie miał w wywiadzie przeszczepu narządów, odleżyn, hemodializy, rurki do karmienia ani pobytu w domu opieki. Prowadził aktywny tryb życia z wywiadem łagodnej demencji naczyniowej. Był hospitalizowany z powodu zapalenia płuc i przepisano mu leczenie azytromycyną. Po hospitalizacji uzyskał dodatni wynik testu na obecność koronawirusa-2 (SARS-CoV-2) i był leczony deksametazonem (6 mg) codziennie przez 10 dni oraz remdesiwirem (200 mg) raz, a następnie 100 mg dziennie przez pięć dni. Ponieważ w badaniu radiologicznym klatki piersiowej stwierdzono konsolidację lewego płata, pacjent był dalej leczony empirycznie ceftriaksonem i azytromycyną. W związku z pogorszeniem się objawów oddechowych zastosowano wentylację nieinwazyjną ciśnieniem dodatnim, a następnie intubację dotchawiczą przez osiem dni. Udało się go ekstubować. Rozwinął gorączkę i otrzymał leczenie przeciwbakteryjne przez 73 dni. Pacjent miał cewnik moczowy i obwodowo wprowadzoną linię centralną w ramieniu przez 35 dni. Badanie posiewu mikrobiologicznego i poziom prokalcytoniny w surowicy pozostawały ujemne i w granicach normy. W 22. dniu hospitalizacji z próbek z układu oddechowego wyizolowano Candida albicans. W 51. dniu w posiewie moczu stwierdzono obecność opornego na azole C. auris. Wyizolowany C. auris (MRSN101498) został przekazany do Multidrug-resistant organism Repository and Surveillance Network (MRSN), gdzie wykonano sekwencjonowanie genomowe. Po wypisaniu pacjenta, pokój szpitalny został oczyszczony przy użyciu nadtlenku wodoru i kwasu nadoctowego, a następnie światła ultrafioletowego-C. Inni pacjenci, którzy dzielili pokoje z pacjentem z C. auris, byli badani pod kątem zakażenia. C. auris nie został wykryty w szpitalu społecznym w Zachodnim NY w ciągu ostatniego roku. Lekarze stwierdzili, że pacjent otrzymywał nadmierną antybiotykoterapię przez dłuższy czas. Badania genomowe wykazały, że sekwencja genomu MRSN101498 była blisko spokrewniona ze szczepem indyjskim z 2013 roku z niewielkimi różnicami genomowymi. Co ciekawe, w MRSN101498 stwierdzono mutację K143R w ERG11, która wiąże się z opornością na triazole u Candida albicans. Analiza polimorfizmu pojedynczych nukleotydów (SNP) w całym genomie podkreśliła również, że MRSN101498 był silnie genetycznie związany z czterema innymi izolatami, z marginalnymi różnicami. Izolaty te zostały powiązane z epidemią w marcu 2017 r. w szpitalu 47 mil na północny wschód od Rochester, NY. Na podstawie obecnych ustaleń jest wysoce prawdopodobne, że izolaty z zachodniego NY mają niedawnego wspólnego przodka. To studium przypadku jest ważne z kilku powodów, w tym braku powiązań epidemiologicznych z zakażeniem C.auris. Ponieważ raporty z sektorów wiejskich są rzadkie, badanie to dotyczy istotnego "martwego punktu" nadzoru. Jednakże, w obecnym badaniu nie udało się zidentyfikować potencjalnych rezerwuarów MRSN101498 w zachodnim NY. Sporobójcze środki dezynfekcyjne były nieskuteczne zarówno w przypadku Clostridioides difficile jak i C. auris. Jednakże, protokoły czyszczenia końcowego, które obejmowały naświetlanie promieniami UV i sporobójcze środki czyszczące, były w stanie skutecznie wyeliminować C. auris. Obecne badania podkreślają rolę nadmiernej ekspozycji na antybiotyki w powstawaniu C. auris. Wskazuje również na wyzwania związane z eliminacją grzybów z pomieszczeń szpitalnych. Autorzy zalecają odpowiednią antybiotykoterapię i procedury czyszczenia w przypadku patogenów lekoopornych.

poniedziałek, 12 grudnia 2022

Tolerancja na leki przeciwgrzybicze u Candida auris przyczynia się do niepowodzenia leczenia

Ostatnie badanie opublikowane w czasopiśmie Biomedicines miało na celu określenie tolerancji przeciwgrzybiczej Candida auris (C. auris) na wszystkie trzy klasy leków przeciwgrzybiczych powszechnie stosowanych w leczeniu inwazyjnej kandydozy. Infekcje mikrobiologiczne są wywoływane przez szkodliwe bakterie, grzyby lub wirusy i dotykają milionów ludzi na całym świecie. Na całym świecie obserwuje się wzrost oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe (AMR), co zagraża systemowi opieki zdrowotnej. Wśród AMR, oporność na leki przeciwgrzybicze występuje głównie u pacjentów z obniżoną odpornością. Grzyby rozwijają się w cieplejszych temperaturach, a zmiany klimatyczne wspomagają ich rozwój. W rezultacie przewiduje się stały wzrost liczby zakażeń grzybiczych na świecie. Naukowcy są szczególnie zaniepokojeni opornością na leki przeciwgrzybicze z powodu ograniczonej liczby klas leków przeciwgrzybiczych. Co zaskakujące, od ponad dekady na rynek nie trafiła żadna nowa klasa leków przeciwgrzybiczych. Jedną z najczęstszych infekcji grzybiczych wywołują drożdżaki z rodzaju Candida. Klinicyści wykazują szczególną troskę o zakażenie grzybicze wywołane przez C. auris ze względu na jego oporność na leki przeciwgrzybicze. Ten patogen grzybowy występuje w ponad 47 krajach na całym świecie i charakteryzuje się śmiertelnością sięgającą 45% wśród pacjentów z zakażeniami krwi. C. auris wykazuje oporność wielolekową. Kiedy dany grzyb jest odporny na więcej niż jeden na trzy lub więcej środków przeciwdrobnoustrojowych, jest znany jako wielolekooporny. Co ciekawe, w niektórych przypadkach C. auris wykazał również pan-lekooporność, gdzie stwierdzono, że nie jest wrażliwy na leki należące do wszystkich klas antybiotyków. Należy zwrócić uwagę na różnicę pomiędzy tolerancją na leki przeciwgrzybicze a opornością na leki przeciwgrzybicze. Oporność przeciwgrzybicza wynika z dziedzicznych zmian genetycznych, co pozwala komórce grzyba na wzrost powyżej minimalnego stężenia hamującego (MIC) w sposób zależny od stężenia. Natomiast tolerancja przeciwgrzybicza wynika z heterogenności fenotypowej, która jest zjawiskiem odwracalnym. Komórki tolerancyjne powoli rosną powyżej MIC. Istotne jest zrozumienie mechanizmów związanych z tolerancją u gatunków Candida. Poprzednie badania wskazały, że wiele czynników, takich jak aneuploidia, jest związanych z tolerancją u gatunków Candida. Chociaż u C. auris stwierdzono tolerancję na azole wspomaganą przez Hsp90, nie jest jasne, czy ten gatunek grzyba jest tolerancyjny na nieazolowe klasy leków przeciwgrzybiczych. Obecnie nie ma dostępnych testów klinicznych pozwalających na identyfikację tolerancji na leki przeciwgrzybicze, co mogłoby być bardzo korzystne w określaniu skuteczności mono- i kombinowanych terapii przeciwgrzybiczych. W tym badaniu wykorzystano testy mikrorozcieńczeń w bulionie i dyfuzji krążkowej, wraz z programem diskImageR, do oceny tolerancji grzybów na różne klasy leków przeciwgrzybiczych. Dodatkowo przeprowadzono analizy w celu sprawdzenia, czy tolerancja grzybów może być usunięta poprzez adiuwantową terapię przeciwgrzybiczą. MIC dla każdego izolatu C. auris oznaczono przy użyciu testów mikrorozcieńczeń w bulionie. Analizowano tolerancję C. auris na różne klasy leków przeciwgrzybiczych, takich jak: flukonazol, amfoterycyna B, itrakonazol, anidulafungina, worykonazol, mikrofungina, kaspofungina i posakonazol. Obrazy każdej płytki dyfuzyjnej uzyskano po 24 godzinach i 48 godzinach przy maksymalnej rozdzielczości. Tolerancję grzybów określano na podstawie wzrostu supra-MIC z testów rozcieńczeń mikrobiologicznych oraz frakcji wzrostu (FoG) w strefie zahamowania (ZOI) z testów dyfuzyjnych. Autorzy przeanalizowali również skuteczność terapii skojarzonej z użyciem środka przeciwgrzybiczego i adiuwanta (chlorochina) wobec C. auris, C. parapsilosis i Issatchenkia orientalis. Ograniczona liczba klinicznych izolatów C. auris wykazywała tolerancję na leki fungistatyczne, takie jak flukonazol, worykonazol, itrakonazol i posakonazol, oraz na leki grzybobójcze, np. amfoterycynę B i kaspofunginę. Tolerancję na azole stwierdzono również u C. parapsilosis, natomiast I. orientalis pozostał oporny na flukonazol. Tolerancja została wykryta po 24 godzinach i 48 godzinach przez FoG i została udokumentowana przy użyciu diskImageR i ImageJ. To odkrycie wskazuje, że specyficzna subpopulacja C. auris jest niewrażliwa na różne środki przeciwgrzybicze. Co ważne, ta metoda kwantyfikacji tolerancji może być stosowana przez kliniczne laboratoria diagnostyczne wraz ze standardowymi testami na wrażliwość/oporność grzybów w celu sformułowania lepszych strategii przeciwgrzybiczych. Tolerancyjne komórki grzybów, które rosły wewnątrz ZOI po podhodowaniu były znacznie mniejsze niż populacja rodzicielska, co wskazuje na obecność heterogenności fenotypowej zamiast zmienności genetycznej. W przyszłości należy zbadać podstawowy mechanizm związany z tolerancją C. auris. Autorzy zaobserwowali zmniejszenie lub zniesienie tolerancji u niektórych izolatów C. auris poprzez połączenie leków przeciwgrzybiczych (azolowych, polienowych i echinokandynowych) z lekiem przeciwmalarycznym (chlorochiną). C. auris był tolerancyjny na kilka leków przeciwgrzybiczych, takich jak kaspofungina, flukonazol, posakonazol, worykonazol, itrakonazol i amfoterycyna B. Tolerancja na grzyby jest zjawiskiem odwracalnym, które można było wykryć po 24 i 48 godzinach. Po raz pierwszy w tym badaniu wykazano, że połączenie leków przeciwgrzybiczych z adiuwantem w postaci chlorochiny może wyeliminować tolerancję i oporność u C. auris. Jednak wyniki muszą zostać potwierdzone za pomocą eksperymentów in vitro i in vivo.